本文摘要
介绍如何从牙刷中提取 DNA。它详细介绍了可在家中完成的基本程序，以及更精确的专业方法。
从牙刷中提取 DNA 通常用于法医调查或个人鉴定。一般程序如下。
安心的国内检测
可以在日本全国各地的附近诊所进行
1. 收集样本
牙刷上有口腔细胞和唾液，因此很可能含有 DNA。使用牙刷后应及时采集样本并保存在干净的容器中。储存时应保持干燥，以防 DNA 降解。
2. 细胞收集
从牙刷毛上的细胞和唾液中提取 DNA 的步骤如下
- 细胞冲洗：用适当的缓冲溶液（如 TE 缓冲液或 PBS）清洗牙刷的刷毛。这一过程可将粘附在牙刷上的细胞转移到溶液中。将整个牙刷浸入清洁溶液中并静置一段时间后，细胞就会被有效地收集起来。
- 离心：收集洗涤液，用离心机收集细胞颗粒。细胞团是提取 DNA 的起点。
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3. 细胞裂解（降解）
向收集的细胞团中加入裂解缓冲液（如使用蛋白酶 K 的缓冲液），以破坏细胞膜并释放 DNA。这一过程是将细胞在温水浴（如 56°C）中培养数小时后进行的。这会破坏细胞核，并将 DNA 释放到溶液中。
4. DNA 提取
裂解后，可采用以下方法回收 DNA
- 苯酚-氯仿萃取：为分离 DNA 和蛋白质，使用苯酚和氯仿进行有机萃取。上层水相中含有 DNA。
- 商用 DNA 提取试剂盒：有许多商用试剂盒可用于高效的 DNA 恢复，可快速、轻松地提取 DNA。
5. 纯化 DNA。
提取的 DNA 可能含有杂质。为去除这些杂质，可使用乙醇沉淀法或其他方法纯化 DNA，以获得纯 DNA。在此过程中，DNA 被沉淀以去除杂质。
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6. DNA 的扩增和分析
由于获得的 DNA 通常数量较少或比较零碎，因此需要使用 PCR（聚合酶链反应）来扩增特定的 DNA 区域，并将其增加到所需的数量。然后对扩增后的 DNA 进行进一步分析，用于识别个体或确认遗传关系。
摘要
从牙刷中提取 DNA 的过程基于从牙刷部位收集细胞和唾液，然后进行适当的裂解、提取和纯化过程。这种方法是法医学、亲子鉴定和其他基因检测中使用的一项重要技术。
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略歴
- 1996年 慶應義塾大学医学部 卒業
- 2004年 慶應義塾大学 医学博士号 取得
- 2005年 慶應義塾大学 皮膚科学教室 助手
- 2008年 ヒロ皮フ形成クリニック 開業
- 2009年 医療法人社団福美会 理事長
- 2015年 医療法人社団福美会 理事
資格・所属
- CAPラボディレクター
- 日本皮膚科学会 皮膚科専門医
- 日本医師会 産業医
- 東京衛生検査所 指導監督医
この記事は、 ヒロクリニックNIPPTの編集・監修体制 にもとづき、資格を持つ医師が内容を確認しています。
堤 修一 （つつみ しゅういち）
医師・医学博士 ／ ヒロクリニック博多駅前院 院長
略歴
- 1993年 東京大学医学部医学科 卒業
- 2016〜2019年 東京大学先端科学技術研究センター 准教授
発信・関連リンク
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参考文献
- Saitoh H, Yoshida K, Shinomiya T, et al. DNA profiling from toothbrushes. Legal Medicine. 2001 Mar;3(1):37-43.
- Burger MF, Demers DB. Use of toothbrushes as a source of DNA for donor identification. Journal of Forensic Sciences. 2005 May;50(3):611-615.
- Wiegand P, Kleiber M. DNA profiling from toothbrushes. International Journal of Legal Medicine. 1997;110(2):90-93.
