本文摘要
进一步了解如何从用过的口香糖中提取 DNA。了解科学方法、所需程序和伦理考虑因素。
咀嚼口香糖后提取 DNA 的方法主要是从唾液和口香糖上残留的口腔细胞中恢复 DNA。具体步骤如下。
1. 收集样本
尽快用干净的容器或密封袋收集用过的口香糖。口香糖最好保持干燥，但也可保持干燥以防止储存期间 DNA 降解。
2. 细胞裂解（降解）
裂解过程，分解附着在口香糖上的细胞，释放 DNA。
- 加入裂解缓冲液：将口香糖切成小块，加入裂解缓冲液（如含有蛋白酶 K 的缓冲液）。这种缓冲液会破坏细胞膜，使 DNA 释放到溶液中。
- 孵育：将浸泡在缓冲液中的口香糖块放在温水浴（约 56°C）中孵育数小时或过夜。这样可以降解细胞并将 DNA 提取到溶液中。
3. DNA 提取
要回收溶解在裂解缓冲液中的 DNA，可采用以下方法
- 去除口香糖：培养后，去除口香糖残渣，剩余液体中含有 DNA。
- 有机萃取法：苯酚-氯仿萃取法用于从蛋白质和其他杂质中分离 DNA。在苯酚-氯仿萃取法中，上层水相（含 DNA）被小心收集。
- 商用 DNA 提取试剂盒：商用 DNA 提取试剂盒也很有效，尤其适用于从小样本中提取 DNA。
4. 纯化 DNA
由于提取的 DNA 可能含有杂质，因此要去除这些杂质，以获得纯净的 DNA。
- 乙醇沉淀法：用乙醇沉淀 DNA 以去除杂质。
- 硅胶柱纯化：还可使用硅胶柱进一步纯化 DNA。
5. DNA 的扩增和分析
由于获得的 DNA 通常数量较少，因此要使用 PCR（聚合酶链反应）来扩增特定的 DNA 区域。然后将这些 DNA 用于基因分析。最常见的分析方法是 STR 分析和 DNA 测序，用于识别个体和确认遗传关系。
摘要
从唾液或咀嚼口香糖后残留的口腔细胞中提取 DNA 的过程包括裂解、提取、纯化和扩增等阶段。这种方法是用于特定 DNA 分析（如法医调查和个人身份鉴定）的重要技术。
略歴
- 1996年 慶應義塾大学医学部 卒業
- 2004年 慶應義塾大学 医学博士号 取得
- 2005年 慶應義塾大学 皮膚科学教室 助手
- 2008年 ヒロ皮フ形成クリニック 開業
- 2009年 医療法人社団福美会 理事長
- 2015年 医療法人社団福美会 理事
資格・所属
- CAPラボディレクター
- 日本皮膚科学会 皮膚科専門医
- 日本医師会 産業医
- 東京衛生検査所 指導監督医
この記事は、 ヒロクリニックNIPPTの編集・監修体制 にもとづき、資格を持つ医師が内容を確認しています。
堤 修一 （つつみ しゅういち）
医師・医学博士 ／ ヒロクリニック博多駅前院 院長
略歴
- 1993年 東京大学医学部医学科 卒業
- 2016〜2019年 東京大学先端科学技術研究センター 准教授
発信・関連リンク
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参考文献
- Jensen TZT, Niemann J, Klemmensen KH, Morrison HC, Girdland Flink L, Sjögren KG, et al. A 5700-year-old human genome and oral microbiome from chewed birch pitch. Nat Commun. 2019 Dec 17;10(1):5520.
- Pfeiffer H, Jbayer J, Brinkmann B. PCR-typing of DNA from chewing gum. Int J Legal Med. 1999;112(2):115-7.
